近日，昆明医科大学生物医学工程学院/研究院陈策实团队在肿瘤免疫治疗领域权威期刊Journal for ImmunoTherapy of Cancer（JITC）在线发表题为"In situ generation of proinflammatory CAR macrophages via mRNA-TLR agonist co-delivery for triple-negative breast cancer immunotherapy"的原创研究论文。2025年，团队在国际知名期刊Nano Today发表研究成果，首次提出利用脂质纳米颗粒在体内直接递送Trop2的CAR DNA，实现原位构建CAR巨噬细胞。然而，该前期策略在实体瘤微环境中抗肿瘤效果有限，主要归因于肿瘤免疫抑制微环境显著削弱了CAR巨噬细胞的促炎极化能力，使其难以维持M1型功能状态，进而制约了抗肿瘤活性。针对此瓶颈，研究团队创新构建了一种靶向巨噬细胞的mRNA脂质纳米颗粒递送平台，通过同时递送编码Trop2特异性CAR的mRNA和TLR7/8激动剂R848，实现体内原位生成促炎型CAR巨噬细胞（CAR-M），在三阴性乳腺癌原发灶、术后复发及肺转移模型中均展现出优异的治疗效果，为实体瘤CAR免疫治疗提供了新的技术路线。
嵌合抗原受体（Chimeric Antigen Receptor，CAR）免疫治疗近年来取得了巨大成功，但传统CAR-T及CAR-M治疗均需要复杂的体外细胞制备过程，生产成本高、周期长，同时肿瘤免疫抑制微环境容易使CAR巨噬细胞失去抗肿瘤活性，严重限制了其临床应用。
针对上述问题，研究团队设计了一种甘露糖修饰脂质纳米颗粒（M-LNP）递送系统，可同时递送编码Trop2特异性CAR的mRNA和TLR7/8激动剂R848。该平台利用甘露糖介导巨噬细胞靶向摄取，实现CAR mRNA在肿瘤相关巨噬细胞中的高效表达，同时通过R848持续激活TLR信号通路，使巨噬细胞维持促炎M1型状态，从而实现体内原位构建功能性CAR巨噬细胞。
图1. 体内原位CAR巨噬细胞治疗策略示意图
体外实验结果表明，M-LNP能够优先进入巨噬细胞并高效递送CAR mRNA，实现稳定CAR表达。与单独递送CAR mRNA相比，同时递送R848可显著促进巨噬细胞向M1型极化，提高iNOS等促炎分子表达，降低Arg-1等免疫抑制标志物水平，还可有效促进T细胞增殖及抗肿瘤免疫激活，实现先天免疫与适应性免疫协同作用，为持续抗肿瘤免疫提供保障。
图2. 原位CAR巨噬细胞具有更强抗肿瘤功能。与单独表达CAR相比，协同递送R848能够持续诱导巨噬细胞向M1型极化，提高抗原特异性吞噬能力，同时增强T细胞增殖和免疫激活能力，实现先天免疫和适应性免疫协同抗肿瘤。
研究团队进一步在三阴性乳腺癌小鼠模型、人源化小鼠模型以及肺转移模型中验证了该策略的治疗效果。结果显示，静脉注射M-LNP/CAR+R848后，可在体内持续诱导CAR巨噬细胞生成，并显著促进肿瘤相关巨噬细胞向M1型极化，增强树突状细胞成熟以及CD8? T细胞和NK细胞浸润，重塑肿瘤免疫微环境。不仅显著抑制原发肿瘤生长，而且有效延长肺转移模型生存时间；在人源化三阴性乳腺癌模型中，还明显降低术后肿瘤复发，显示出良好的安全性和临床转化潜力。
图3. 原位CAR巨噬细胞显著抑制三阴性乳腺癌生长和术后复发。M-LNP/CAR+R848治疗后，可持续在体内生成CAR巨噬细胞，显著抑制三阴性乳腺癌生长，促进树突状细胞成熟，提高CD8? T细胞浸润，并有效重塑肿瘤免疫微环境。该策略不仅能够有效抑制肿瘤生长，还可显著降低术后复发。
该研究建立了一种具有良好可控性、可重复给药和非基因组整合风险的新型CAR-M治疗平台，为实体瘤特别是三阴性乳腺癌免疫治疗提供了新的解决方案，也为体内原位免疫细胞工程的发展提供了新的研究思路。
昆明医科大学生物医学工程学院/研究院周靖娥副研究员、硕士研究生胡艺严、高级实验师陈亚娟为论文共同第一作者；昆明医科大学生物医学工程学院/研究院陈策实研究员、李富兵副研究员，华东师范大学孙磊教授、闫志强教授为论文共同通讯作者。
本研究得到国家自然科学基金、云南省基础研究计划重大项目、创新药物研究和发展—国家科技重大专项、云南省乳腺癌靶向肿瘤免疫微环境国际联合实验室等项目资助。
论文doi:10.1136/jitc-2026-015323
供稿：周靖娥；编校：张志毕；审核：陈亚娟、陈策实
